LaMedic.ro
Fondat
2006 |
Site dedicat informarii medicale.
|
Acasã | Semne/Simptome | Boli | Unitati medicale | Medicamente | Articole | Legislaþie | Links | Analize medicale | Forum | Mall | Anunturi | Contact
Mutatia BRAF V600E in tumori
Laboratorul Synevo
Informatii
generale
Proto-oncogena
BRAF (v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1) cu locusul 7q34 este
alcatuita din 18 exoni si codifica o serin/treonin protein-kinaza de 84.4 kDa,
din familia kinazelor Raf implicata in calea de semnalizare intracelulara
Ras/Raf/MEK/ERK (MAPK/ERK), ce transmite semnale de la receptori celulari (de
exemplu, EGFR – epidermal growth factor receptor = receptorul pentru factorul de
crestere epidermica) la nucleu, cu rol in diferentierea, proliferarea,
senescenta si supravietuirea celulara. Aceasta cale de transductie a semnalului
este activata constitutiv in numeroase tipuri de tumori maligne umane de obicei
ca urmare a unor mutatii ale oncogenelor KRAS si BRAF1;2;3.
Mutatiile genei
BRAF pot fi de doua tipuri:
· mostenite (ale liniei germinale) – asociate cu sindromul
cardiofaciocutanat – conditie genetica rara caracterizata prin defecte cardiace,
retard mental si un aspect facial distinctiv;
· dobandite (somatice) – asociate cu forme diferite de cancer (limfom
non-Hodgkin, cancer colorectal, melanom malign, cancer tiroidian papilar, cancer
pulmonar altul decat cel cu celule mici –NSCLC, cancer ovarian)4;5.
Aproximativ 7% dintre tumorile maligne umane contin mutatii BRAF6.
Pana in prezent
au fost identificate peste 50 mutatii distincte ale genei BRAF multe dintre
acestea fiind responsabile de cresterea activitatii BRAF de 1.5 pana la 700 ori,
in functie de tipul mutatiei. Dintre mutatiile BRAF activatoare asociate cu
tumori cea mai frecventa (responsabila de peste 80% din cazuri) este V600E care
are la baza o tranzitie T-A la nivelul nucleotidei 1799 din exonul 15, ce induce
o substitutie a valinei cu acidul glutamic in codonul 600 din segmentul
activator. Consecinta acestei mutatii punctiforme missens este ca situsul de
activare al protein-kinazei devine expus (in mod normal fiind ascuns intr-o
punga hidrofoba), ceea ce conduce la o activare constitutiva BRAF. Astfel,
celulele maligne care prezinta mutatia V600E prolifereaza intr-un mod
independent de factorul de crestere2. Mutatia predispune de asemenea
la inhibarea apoptozei, cresterea invazivitatii tumorii si reprezinta un
eveniment timpuriu in cursul carcinogenezei6.
Aceasta mutatie
a fost identificata in urmatoarele tipuri de tumori:
A. Cancerul
tiroidian papilar
Mutatia V600E
constituie cea mai frecventa modificare genetica in cancerul tiroidian papilar
(~40-50% din cazuri). In urma unui studiu care a urmarit pe o perioada de 15 ani
evolutia unui grup de pacienti cu aceasta forma de cancer s-a constatat
ca mutatia V600E reprezinta un factor de prognostic nefavorabil independent de
celelalte caracteristici clinico-patologice7.
B. Melanomul
malign
Mutatia este
prezenta in aproximativ 50% din cazurile de melanom malign. Studii recente au
aratat ca V600E este asociata formei de boala cu risc inalt (debut precoce,
afectarea primara a trunchiului, lipsa unei afectari cutanate cronice,
supravietuire redusa) si de aici importanta inhibarii teraputice a proteinei
Braf mutante. In 2011 FDA a aprobat medicamentul vemurafenib – inhibitor oral
selectiv al activitatii kinazice a Braf ce contine mutatia V600E – ca tratment
in melanomul malign metastatic. Vemurafenib nu este aprobat in cazul pacientilor
cu gena BRAF de tip salbatic8.
C. Cancerul
pulmonar altul decat cel cu celule mici (NSCLC)
In NSCLC se
raporteaza o frecventa a mutatiei de 1-4%. In aceasta forma de cancer mutatia
BRAF V600E este prezenta mai frecvent la femei, fiind asociata cu o forma
histologica agresiva si cu un prognostic rezervat9.
D. Cancerul
ovarian
Intr-un studiu
recent publicat s-a constatat ca mutatia V600E este asociata cu tumori ovariene
in stadiu initial, histologie de tip borderline seros (cu potential malign
redus) si cu prognostic favorabil. Observatiile pot influenta abordarea
terapeutica a pacientelor cu aceasta forma de tumori ovariene10.
E. Leucemia
cu celule paroase (Hairy-cell Leukemia, HCL)
Mutatia
somatica V600E a fost recent descrisa ca un marker molecular pentru HCL.
Deoarece prezenta sa a fost constatata la majoritatea pacientilor se considera
ca mutatia detine un rol esential in patogenia bolii. De asemenea formele
refractare ar putea beneficia de tratamentul cu inhibitori BRAF11.
F. Cancerul
colo-rectal (CRC)
Calea de
semnalizare intracelulara MAPK/ERK este perturbata frecvent in cancerul
colo-rectal, supraexpresia EGFR fiind raportata in aproximativ 50% din cazuri,
iar mutatii activatoare ale genelor KRAS si BRAF in 30-50% si, respectiv, 10%
din cazuri3 (vezi fig.1)
Celulele
epiteliale normale din colon, in evolutia lor spre malignitate, pot urma mai
multe cai:
• secventa
traditionala adenom-carcinom asociata cu instabilitate cromozomiala si
caracterizata prin acumularea treptata de mutatii ale unor gene specifice – APC,
KRAS si TP53 – ce induc modificari displazice progresive ale epiteliului
colonic;
• o cale
asociata cu instabilitatea microsatelitilor (MSI), mutatii BRAF si metilarea
extensiva a ADN-ului;
• o cale de
“fuziune” asociata cu metilarea enzimei O-6 metilguanin-ADN-metiltransferaza
(MGMT), mutatia KRAS si inactivarea genei care codifica proteina tumorala p53
(TP53).
Desi mutatiile
BRAF au fost observate in principal in CRC sporadic cu MSI, acestea au fost
detectate intr-un procent mic si in formele de cancer cu stabilitate a
microsatelititilor (MSS). In particular, mutatiile BRAF au fost gasite mai
frecvent in polipii colonici premaligni si in CRC timpuriu. Deoarece prezenta
concomitenta a mutatiilor KRAS si BRAF este rar intalnita in polipii colonici
premaligni si in stadiile timpurii de CRC, acestea sunt considerate mutatii
alternative sau mutatii ce se exclud reciproc12.
Atat mutatiile
KRAS cat si cele BRAF nu sunt decat in mod exceptional prezente in CCR asociat
cu sindromul Lynch (sindromul cancerului colorectal nonpolipozic ereditar –
HNPCC). Aceasta afectiune este cauzata de mutatii ale liniei germinale ce
afecteaza genele care intervin in repararea erorilor aparute la nivelul
materialului genetic in timpul procesului de replicare – MMR (MMR – “mismatch
repair genes”) reprezentate de MLH1, MSH2, MSH6, PMS2. Alterarea functiei
acestor gene este strans asociata cu fenomenul MSI, respectiv insertia sau
deletia unor scurte unitati repetitive (tip CA) din constitutia microsatelitilor
(segmente de ADN alcatuite din secvente care cuprind 1-5 perechi de nucleotide,
repetate in tandem si localizate in regiunile codificatoare sau necodificatoare
ale unor gene). Din acest motiv, testarea tesuturilor tumorale pentru prezenta
MSI impreuna cu demonstrarea pierderii expresiei proteinelor MMR prin
imunohistochimie este utila pentru stabilirea diagnosticului de sindrom Lynch.
Totusi trebuie avut in vedere faptul ca fenotipul tumoral asociat cu MSI nu este
limitat la cancerele ereditare, fiind intalnit si in aproximativ 20% din
cazurile de CRC sporadic. Astfel, testarea MSI nu poate distinge intre o mutatie
somatica (sporadica) si o mutatiei a liniei germinale (mostenita) si nici nu
poate identifica gena afectata. De asemnea nici testarea imunohistochimica nu
poate face aceasta distinctie, desi identifica gena responsabila.
Cel mai adesea
prezenta unor defecte MMR in CRC sporadic se datoreaza unor anomalii la nivelul
genei MLH1, iar cea mai frecventa cauza de inactivare a genei este
hipermetilarea promotorului (fenomen epigenetic). Mai mult, in aproximativ 70%
din tumorile care prezinta hipermetilarea promotorului MLH1 a fost identificata
mutatia BRAF V600E. Este important faptul ca mutatia V600E nu a fost
identificata pana in prezent in tumori asociate cu mutatii MLH1 ale liniei
germinale. Astfel, testarea mutatiei BRAF V600E poate diferentia o mutatie a
liniei germinale de o inactivare somatica/epigenetica MLH113.
Testarea
mutatiei V600E in CRC prezinta si implicatii terapeutice. Deoarece Braf kinaza
este situata in aval de EGFR si KRAS in cascada MAPK, tumorile ce contin mutatia
V600E cu activare persistenta a acestei cai de transductie a semnalului sunt
rezistente la orice tip de terapie anti-EGFR. Prin urmare, inainte de
administrarea tratamentului cu inhibitori de tirozinkinaza EGFR este necesara
testarea prezentei mutatiei V600E a genei BRAF pentru identificarea corecta
a pacientilor care pot beneficia de terapie3.
Recomandari
pentru testarea mutatiei BRAF V600E
· in
CRC metastatic pentru selectarea pacientilor la care este oportuna administrarea
unui inhibitor EGFR (marker molecular cu valoare predictiva privind raspunsul la
tratamentul anti-EGFR);
· screening-ul sindromului Linch in cazul tumorilor cu MSI ce
demonstreaza imunohistochimic pierderea expresiei proteinei MLH1;
· in
melanomul malign pentru a anticipa raspunsul clinic la inhibitori BRAF (de
exemplu vemurafenib) sau MEK;
· in
carcinomul tiroidian papilar pentru evaluarea prognosticului6;14.
Specimen
recoltat – sectiuni
nefixate, necolorate din tesut conservat in parafina (4-5 lame); cu ajutorul
unui marker carioca vor fi evidentiate zonele in care este prezent tesutul
tumoral15.
Metoda - secventierea
exonului 15 al genei BRAF15.
Raportarea si
interpretarea rezultatelor
Va fi
comunicata prezenta sau absenta mutatiei BRAF V600E in ADN-ul extras din tesutul
tumoral15.
Interpretarea
rezultatului obtinut este in functie de tipul tesutului tumoral:
· In
cancerul papilar tiroidian mutatia BRAF V600E reprezinta un nou indicator de
progresie si agresivitate a bolii.
· Pacientii cu melanom malign care prezinta mutatia V600E pot beneficia
de tratmentul cu vemurafenib.
· Tumorile colonice care prezinta alaturi de hipermetilarea promotorului
MLH1 si mutatia BRAF V600E sunt cu mare probabilitate sporadice.
· Prezenta mutatiei V600E in gena BRAF se asociaza cu un prognostic
nefavorabil si cu absenta rapunsului la tratamentul cu anti-EGFR a pacientilor
cu tumori metastatice de colon6;13;14.
Limite si
interferente
Mutatia BRAF
V600E poate fi detectata numai daca in proba se gaseste un procent de celule
tumorale de minimum 25%14;15.
Testarea
mutatiei in tumora primara vs. leziunile metastatice poate da uneori rezultate discordante.
Nu toti
pacientii cu melanom malign avand mutatia V600E vor raspunde la tratamentul
anti-BRAF.
Nu toti
pacientii cu CCR metastic si gena BRAF de tip salbatic vor benficia de terapia
anti-EGFR13
Bibliografie
1. BRAF (v-raf
murine sarcoma viral oncogene homolog B1). In Atlas of Genetics and Cytogenetics
in Oncology and Haematology. http://atlasgeneticsoncology.org. Reference Type:
Internet Communication.
2. Safaee
Ardekani G, Jafarnejad SN, Tan L, Saeedi A, Li G. The Prognostic Value of BRAF
Mutation in Colorectal Cancer and Melanoma: A Systematic Review and
Meta-Analysis. In PloS 2012;7(10):e47054.
3. Tie J, Desai
J. BRAFV600E as a Therapeutic Target in Colorectal Cancer. In European Oncology,
2010:6(1):60-4.
4. BRAF (v-raf
murine sarcoma viral oncogene homolog B1). www.ncbi.nlm.nih.gov. Reference Type:
Internet Communication.
5. Sarcozy A,
Carta C et al. Germline BRAF mutations in Noonan, LEOPARD and
cardiofaciocutaneous Syndrome: moleculatr diversity and associted phenotypic
spectrum. In Hum. Mutat. 2009 Apr; 30(4):695-702.
6. BRAF V600E
Mutation Detection. Henry Ford Health System. Pathology and Laboratory Medicine.
www.henryford.com. Reference Type: Internet Communication.
7. Elisei R,
Ugolini C et al. BRAFV600E Mutation and Outcome of Patients with Papillary
Thyroid Carcinoma: A
15-Year Median
Follow-Up Study. In J. Clin. Endocrinol. Metab. 2008 Oct;93(10):3943-9.
8. Vora N,
Buehler B et al. Melanoma and BRAF. Medscape Reference. http://emedicine.medscape.com.
2011.
9. Marchetti A,
Felicioni L, et al. Clinical features and Outcome of patients with
Non-Small-Cell Lung Cancer Harboring BRAF Mutations. In JCO Sept. 2011, vol.29,
no.26, 3574-3579.
10. Grisham RN,
Iyer G, et al. BRAF mutation is associated with early stage disease and improved
outcome in patients with low-grade serous ovarian cancer.
11. Dietrich S,
Glimm H. BRAF Inhibition in Refractory Hairy-Cell Leukemia. In N Engl J Med
2012; 366:2038-2040.
12. Monticone
M, Biollo E et al. Gene expression deregulation by KRAS G12D and G12V in a BRAF
V600E context. In Mol Cancer, 2008;7: 92.
13. Mayo
Clinic. Mayo Medical Laboratories. BRAF Mutation (V600E) Analysis.
www.mayomedicallaboratories.com. Reference Type: Internet Communication, 2013.
14. Cleveland
Clinic Laboratories. BRAF V600E Mutation Analysis. Reference Type : Internet
Communication, 2013.
15. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2013. Ref Type: Catalog.
eMedic.ro | laAnunt.ro | laExecutareSilita.ro | laHotel.ro | laZiar.ro | la-Facultate.ro | la-Firma.ro | la-Mall.ro | la-Masa.ro | la-Televizor.ro | Spune-ti parerea.ro
la-Romania.ro
|
la-AlbaIulia.ro
|
la-Alexandria.ro
|
la-Arad.ro
|
la-Bacau.ro
|
la-BaiaMare.ro
|
la-Balti.ro
|
la-Barlad.ro
|
la-Bistrita.ro
|
la-Botosani.ro
|
la-Braila.ro
|
la-Brasov.ro
|
la-Bucuresti.ro
|
la-Buzau.ro
|
la-Calarasi.ro
|
la-Chisinau.ro
|
la-ClujNapoca.ro
|
la-Constanta.ro
|
la-Craiova.ro
|
la-Deva.ro
|
la-DrobetaTurnuSeverin.ro
|
la-Focsani.ro
|
la-Galati.ro
|
la-Giurgiu.ro
|
la-Hunedoara.ro
|
la-Iasi.ro
|
la-Medias.ro
|
la-MiercureaCiuc.ro
|
la-Onesti.ro
|
la-Oradea.ro
|
la-PiatraNeamt.ro
|
la-Pitesti.ro
|
la-Ploiesti.ro
|
la-RamnicuSarat.ro
|
la-RamnicuValcea.ro
|
la-Resita.ro
|
la-Roman.ro
|
la-SatuMare.ro
|
la-SfantuGheorghe.ro
|
la-Sibiu.ro
|
la-Slatina.ro
|
la-Slobozia.ro
|
la-Suceava.ro
|
la-Targoviste.ro
|
la-TarguJiu.ro
|
la-TarguMures.ro
|
la-Timisoara.ro
|
la-Tulcea.ro
|
la-Turda.ro
|
la-Vaslui.ro
|
la-Zalau.ro
eSante.ro | Journaux.ro | laTele.ro | Magasins.ro | Medecin.ro | Universites.ro
©2013